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小鼠I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒

小鼠I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒

简要描述:
小鼠I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中 I 型胶原蛋白(ColⅠ)的含量。

更新时间:2024-06-26

访问量:1222

厂商性质:代理商

生产地址:中国

<strong>小鼠I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒</strong>

小鼠I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒


一、产品说明

货号:MM-0993M1、MM-0993M2

规格:96T、48T

试剂盒性能:

1.样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值为 0.95 以上。

2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于 10%和 10% 。

检测范围:1.25 ng/mL - 40 ng/mL 

灵敏度:最小低检测浓度小于 0.1 ng/mL

保存条件及有效期:

1.试剂盒保存: 2-8℃。

2.有效期: 6 个月


二、小鼠I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒组成

<strong>小鼠I型胶原蛋白(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒</strong>


三、样本处理及要求:

1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收 集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次 离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过 程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液, 细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离 心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

 

四、操作步骤

1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;。

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 加酶:每孔加入酶标试剂 100μl,空白孔除外。

4. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 60 分钟。

5. 配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用。

6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

7. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟. 

8. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

9. 测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

 

五、注意事项:

1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6. 底物请避光保存。


温馨提示:本产品提供代测服务,凡购买本公司ELISA试剂盒的客户,均可享受免费的ELISA代测服务。详情可询我司在线客服和经理!



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