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3D细胞球体培养基质胶

3D细胞球体培养基质胶

简要描述:
3D细胞球体培养基质胶包含整套基质胶、胶体固定液、胶体溶解液,可应用到 3D 细胞培养与微环境应用等;本试剂盒操作便利且可调控基质胶硬度进行多种细胞培养测试等;胶体可快速被固定液分解, 请操作前详细阅读此使用指南。 (基质胶套装为植物来源,无动物源成分、不含酚红)

更新时间:2022-02-28

访问量:102

厂商性质:代理商

生产地址:美国

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3D细胞球体培养基质胶

应用:

•3D 细胞球体培养 

•小鼠皮下成瘤 

•细胞侵袭 

•适合用于 3D 细胞药物筛检平台 

•细胞生长和分化 

•代谢/毒理学研究


样本类型: 

•肿瘤细胞系、哺乳动物组织


试剂组分

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3D 细胞球体培养试验步骤: 

A、试剂制备 

1、A 基质胶:将 A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟, 确认完全融解. 

2、C 缓冲溶液(1X)制备:使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如: 无血清 DMEM、opt-MEM) 制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) . 

3、D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液. 


B、3D细胞球体培养基质胶的制备 

全部步骤需要在无菌环境内操作,操作步骤如下: 

1、将 24 孔培养板放置于冰上预冷半小时。 

2、细胞计数后取 2×105~2×107 细胞与 0.5 毫升 37℃ 细胞培养基均匀混合,并与 0.5 毫升 37℃ A 胶 按照 1:1 等比例均匀混合,最终细胞密度 1*105~1*107cells/mL。 注:请选择适当的培养溶液与条件进行试验。 

3、取 20-40 微升步骤 2 的混合液滴于 步骤 1 预冷的培养板上,胶体将于 5 分钟内成胶。 注: 测试胶 体是否成胶,可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。 

4、待胶体成胶后,添加 1 毫升冰的 1X C 缓冲溶液,并盖过步骤 3 的胶溶液,固定 15 分钟。 

5、待 15 分钟固定后,小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。

6、将含有细胞的胶于 37°C 二氧化碳培养箱内进行 7~14 天的培养,并观察细胞球体的形成,按正常培养 基更换频率进行更换操作。 


C、溶胶与收集细胞球体准备程序 

1、小心的将培养基吸取移除,并用 1X PBS 进行清洗。 

2、小心的将 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的 D 缓冲溶液,盖过胶滴于室温反应 5 分钟。 

3、温和的用 1 毫升移液管吸取,直到胶滴完全溶解。 

4、将含有细胞球体的溶液吸入 1.5 毫升离心管,用 1000 rpm 的转速离心 10 分钟,移除上清液体并收集 细胞球体做分析。 


D、收集单颗细胞准备程序 

在分离单细胞前,先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作 

1、添加 trypsin-EDTA 并与收集的细胞球体于 37°C 混合反应。 

2、用 1 毫升移液管混合,直到细胞体完全分解。 

3、待细胞球体完全分解,加入 3 倍体积的 1X PBS,并用 1000 转的转速进行离心 10 分钟,并移除上清 液体收集沉淀的单细胞做分析。


B-P-00002系列基质胶可替代corning基质胶货号:356234、356235、356237、356230、356231、354248、354263


深圳市安培生物科技有限公司是美国Biozellen公司的中国代理商。Biozellen®3D细胞培养基质胶现货供应,经验证可完全替代BD/康宁的基质胶,来源为植物源且氨基酸序列100%人源化,无人畜共患病的病原菌或毒素污染,提供完整售后服务和技术支持。尊敬的客户您如在订购过程中遇到任何问题都可以与我司客户经理联系寻求帮助。


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