销售热线

19126518388
  • 技术文章ARTICLE

    您当前的位置:首页 > 技术文章 > Biozellen 3D类器官培养基质胶使用方法

    Biozellen 3D类器官培养基质胶使用方法

    发布时间: 2022-02-21  点击次数: 192次

    近年来,为尽可能的模仿细胞在生物体内的生长环境,得到更接近类似于体内生长的细胞, 越来越多研究人员开始关注三维细胞、类器官培养技术。

    以下为大家介绍Biozellen 3D类器官培养基质胶的使用步骤:

     

     

    A、试剂制备

    A 基质胶:将 A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟, 确认完全融解.
    C 缓冲溶液(1X)制备:使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如: 无血清 DMEM、opt-MEM) 制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) .
    D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液.

     

    B、Biozellen®3D 类器官培养基质胶的制备

    全部步骤需要在无菌环境内操作,操作步骤如下:
    1. 将 24 孔培养板放置于冰箱或者冰上预冷。
    2. 细胞计数后取 2×105~2×107 细胞与 0.5ml 37℃ 培养基均匀混合,并与 0.5ml 37℃ A 胶按照 1:1 等比例均匀混合,最终细胞密度 1*105~1*107cells/mL。
    注:请选择适当的培养溶液与条件进行试验。
    3.取 20-40 微升步骤 2 含细胞的混合 A 胶溶液滴于 步骤 1 预冷的培养板上,胶体将于 5 分钟内成胶。
    注: 测试胶体是否成胶,可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。
    4.待胶体成胶后,添加 1 毫升冰的 1X C 缓冲溶液,并盖过步骤 3 的胶溶液,固定 15 分钟。
    5.待 15 分钟固定后,小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。
    6 将含有细胞的胶于 37°C 二氧化碳培养箱内进行 7~14 天的培养,并观察细胞球体的形成,按正常培养基更换频率进行更换操作。

     

    C、溶胶与收集细胞球体准备程序

    小心的将培养基吸取移除,并用 1X PBS 进行清洗。
    小心的将 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的 D 缓冲溶液,盖过胶滴于室温反应 5 分钟。
    温和的用 1 毫升移液管吸取,直到胶滴完全溶解。
    将含有细胞球体的溶液吸入 1.5 毫升离心管,用 1000 rpm 的转速离心 10 分钟,移除上清液体并收集细胞球体做分析。

     

    D、收集单颗细胞准备程序

    在分离单细胞前,先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作
    1. 添加 trypsin-EDTA 并与收集的细胞球体于 37°C 混合反应。
    2. 用 1 毫升移液管混合,直到细胞体完全分解。

    3. 待细胞球体完全分解,加入 3 倍体积的 1X PBS,并用 1000 转的转速进行离心 10 分钟,并移除上清液体收集沉淀的单细胞做分析。

     

    以上就是本期的内容,更多资讯,欢迎点击安培生物网站链接了解更多技术与产品资讯

     

    安培生物科技有限公司介绍:

    安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户,提供独特细胞体内可代谢的核酸转染试剂;inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产,包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等,为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务;提供以植物生物为平台基因序列全人源化、独特的细胞培养可分解3D基质胶产品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务,努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。

     

    深圳市安培生物科技有限公司是美国Biozellen公司的中国代理商。Biozellen®3D培养基质胶经验证可完全替代BD/康宁的基质胶,来源为植物源且氨基酸序列人源化,无人畜共患病的病原菌或毒素污染,提供完整售后服务和技术支持。

在线咨询
咨询热线

0759-5588931

[关闭]