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Biozellen®3D细胞培养基质胶在3D细胞球体培养试验
发布时间： 2022-02-21 点击次数： 1037次3D 细胞球体培养试验步骤：A、试剂制备1、A 基质胶：将 A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟， 确认*融解.2、C 缓冲溶液(1X)制备：使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如： 无血清 DMEM、opt-MEM)制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) .3、D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液.B、Biozellen®3D 细胞培养基质胶的制备全部步骤需要在无菌环境内操作，操作步骤如下：1、将 24 孔培养板放置于冰上预冷半小时。2、细胞计数后取 2×105~2×107 细胞与 0.5 毫升 37℃ 细胞培养基均匀混合，并与 0.5 毫升 37℃ A 胶按照 1:1 等比例均匀混合，最终细胞密度 1*105~1*107cells/mL。注：请选择适当的培养溶液与条件进行试验。3、取 20-40 微升步骤 2 的混合液滴于 步骤 1 预冷的培养板上，胶体将于 5 分钟内成胶。 注: 测试胶体是否成胶，可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。4、待胶体成胶后，添加 1 毫升冰的 1X C 缓冲溶液，并盖过步骤 3 的胶溶液，固定 15 分钟。5、待 15 分钟固定后，小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。6、将含有细胞的胶于 37°C 二氧化碳培养箱内进行 7~14 天的培养，并观察细胞球体的形成，按正常培养基更换频率进行更换操作。C、溶胶与收集细胞球体准备程序1、小心的将培养基吸取移除，并用 1X PBS 进行清洗。2、小心的将 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 缓冲溶液，盖过胶滴于室温反应 5 分钟。3、温和的用 1 毫升移液管吸取，直到胶滴*溶解。4、将含有细胞球体的溶液吸入 1.5 毫升离心管，用 1000 rpm 的转速离心 10 分钟，移除上清液体并收集细胞球体做分析。D、收集单颗细胞准备程序在分离单细胞前，先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作1、添加 trypsin-EDTA 并与收集的细胞球体于 37°C 混合反应。2、用 1 毫升移液管混合，直到细胞体*分解。3、待细胞球体*分解，加入 3 倍体积的 1X PBS，并用 1000 转的转速进行离心 10 分钟，并移除上清液体收集沉淀的单细胞做分析。以上就是本期的内容，更多资讯，欢迎点击安培生物网站链接了解更多技术与产品资讯。
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深圳市安培生物科技有限公司是美国Biozellen公司的中国代理商。Biozellen®3D培养基质胶经验证可*替代BD/康宁的基质胶，来源为植物源且氨基酸序列人源化，无人畜共患病的病原菌或毒素污染，提供完整售后服务和技术支持。
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