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    转染HGF-1牙龈成纤维细胞, 质粒大小10646bp

    发布时间: 2021-07-05  点击次数: 189次

    1.可转染极度难转染的免疫细胞,悬浮细胞,如T细胞,NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;

    2.可高效率转染sirRNA、小分子到任何哺乳动物细胞;

    3.转染细胞后可10小时内快速代谢的第三代新转染试剂;

    转染条件:

    细胞密度:60左右

    质粒DNA浓度:648ng/ul

    质粒DNA大小:10646bp

    培养板:6孔板

    转染试剂用量:8ul

    质粒DNA用量:电讯

    转染试剂:AD600150,Advanced DNA RNA转染试剂

    转染时间:48小时

    血清:z7010-500 胎牛血清

    细胞冻存:CE70100T无血清细胞冻存液

    细胞活力检测:K009-500,cck8

     

     

    重要指导方针:

    -质粒DNA必须溶解在ddH 2 O中。如果溶解在Buffer中,转染效率会下降70%,甚至导致转染失败。

    -质粒DNA必须去内毒素,否则转染效率会下降70%,甚至导致转染失败。

    - 在制备转染复合物时,不能使用其他试剂稀释核酸或转染试剂。只需将核酸和转染试剂按照1:1的关系直接混合即可。否则,转染效率将下降80%,甚至导致转染失败。

    -检查并与转染试剂混合后,用移液管吹吸10-15次以充分混合,确保管壁无液体残留。

    - 将核酸与转染试剂混合并在室温下孵育至少 10-15 分钟。

    - 将复合物加入细胞培养板并轻轻混匀,将板置于 CO 2 培养箱中继续培养。

    - 在整个转染实验过程中,细胞可以在完全培养基中培养,而不是使用无血清培养基。

    - 如果转染后显微镜下观察到白色或黑色圆形颗粒,则为转染试剂的新材料颗粒。

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