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    常用的卵巢癌细胞的培养及细胞表达

    发布时间: 2021-10-09  点击次数: 1004次

    整理一篇关于卵巢癌细胞的培养方法和细胞的特征特点,由于卵巢癌早期缺少症状,即使有症状也不特异,筛查的作用又有限,因此早期诊断比较困难,就诊时60%~70%已为晚期,而晚期病例又疗效不佳,卵巢癌方向的研究也成为了目前基础医学实验研究重点,下面我们分享部分我们实验室有的卵巢细胞株的培养方法和特征。       

    部分细胞形态

    image.png

    CELL Name:NIH OVCAR

    image.png

    Cell Name:SK-OV-3



    细胞系
    形态特征培养基
    其他
    ID8小鼠卵巢表面上皮细胞单层,贴壁生长

    90%DMEM高糖(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A 双抗(SD0038)

    DMEM完全培养基(货号:MD0101);

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    在C57BL/6小鼠体内,可导致腹腔肿瘤和腹水的形成;常被用作卵巢癌的同基因小鼠模型

    caov-3

    人;卵巢腺癌细胞

    来源于卵巢组织;上皮细胞样

    90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0200)+SP(SD0008)+G/A (SD0038)

    DMEM完全培养基(货号:MD0125)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)


    Caov-4

    人;腺癌

    来源于转移部位:输卵管的浆膜下层;上皮细胞;贴壁Leibovitz的 L-15 培养基加入20%胎牛血清FBS

    CHO

    仓鼠;卵巢细胞


    90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    完全培养基:F12K完全培养基(货号:MD0401)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)


    CHO-K1

    仓鼠;卵巢细胞亚株

    来源于卵巢组织;上皮细胞

    90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    完全培养基:F12K完全培养基(货号:MD0401)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    完全冻存液:无血清细胞冻存液 (SD0002)


    CHO/dhFr-

    仓鼠;卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷

    来源于正常卵巢组织;上皮细胞IMDM培养基加入10%优质胎牛血清FBS;添加0.1mM次黄嘌(漂)呤,0.016mM胸腺嘧啶,100nM氨甲喋呤。该细胞为二氢叶酸还原酶缺陷细胞。  在没有HT(次黄嘌(漂)呤-胸腺嘧啶)时细胞会死亡。细胞培液中加氨甲喋呤可以防止对药物低抗性的回变细胞的生长。
    CTLA4 Ig-24仓鼠;卵巢细胞来源于卵巢组织;上皮细胞

    90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    DMEM完全培养基(货号:MD0101)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)


    ES-2

    人;卵巢透明细胞癌

    来源于低分化卵巢透明细胞癌组织;成纤维细胞;贴壁;致癌

    90%McCOY's 5A(MD0900)+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)

    完全培养基:McCOY's5A完全培养基(货号:MD0901)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)

    在裸鼠中成瘤。该细胞对多种化疗药物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表现出低到中等的耐受性。ES-2细胞表达低水平的P糖蛋白。

    HEY

    人;III期卵巢乳头状囊腺癌

    来源于子房组织;上皮细胞;贴壁;致癌

    90%1640基础(MD0200) +10%FBS(SD0100)+1%GA(SD0038)  

    完全培养基链接:1640完全培养基(MD0201)


    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)

    HEY细胞系对烷基化剂顺二胺二氯铂(II)(顺铂)表现出一定程度的抗性

    HO-8910

    人;卵巢癌细胞

    来源于卵巢癌病人腹水中;上皮细胞样RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),加入10%胎牛血清。转移到裸鼠中形成的肿瘤集聚与患者原病灶处的形态一致。
    HO-8910PM人;高转移卵巢癌细胞
    RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),加入10%胎牛血清。

    Lec1

    仓鼠;卵巢细胞

    来源于卵巢组织;上皮细胞

    90%αMEM(MD0804)+10%胎牛血清(SD0100)+肌醇 43.2mg/L(SD0014)+叶酸 8.82mg/L(SD0016)+β-巯基乙醇 7.8mg/L(SD0031)+G/A (SD0038)

    完全培养基:αMEM完全培养基(货号:MD0807)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)

    Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是从脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑选出来的能抗麦芽凝集素的突变株。Lec1 缺乏称作GlcNAc-T1的糖基转移酶,从而N-连接碳水化合物被阻断在Man5GlcNAc2Asn中间体。对于研究N-连接糖基化改变对内源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA转染产生的糖蛋白的功能和区隔化的影响,这些细胞十分有用。

    NIH:OVCAR-3

    人;卵巢癌细胞

    来源于卵巢腺癌病人恶性腹水;上皮细胞;贴壁;致癌

    80%1640(MD0200)+20%胎牛血清(SD0200)+0.01 mg/ml牛胰岛素(SD0020)+G/A (SD0038)

    完全培养基:1640完全培养基(货号:MD0220)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)

    与107细胞联合皮下接种5只裸鼠21天后全部成瘤。NIH-OVCAR-3是研究卵巢癌药物抗性的一个合适的模型系统且由于存在激素受体,这对于激素治疗的评估或许是有用的。

    OV-90

    人;3级,IIIC期,恶性乳头状浆液性腺癌

    来源于卵巢癌转移部位:腹水;上皮;贴壁;致癌

    42%MCDB 105+42%M 199(MD0950)+15%FBS(SD0200)+1%GA(SD0038)

    完全培养基:MCDB105/M199完全培养基(MD1203)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)

    致病基因:her2/neu +, p53 (mutated,Ser--> Arg mutation at exon 6, codon   215) Ref

    表达角蛋白基因

    SK-OV-3

    人;卵巢癌细胞

    来源于卵巢腺癌,腹水转移;上皮细胞

    90%McCOY's 5A(MD0900)+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)

    完全培养基:McCOY's5A完全培养基(货号:MD0901)

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度。

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)

    此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受,

    SW 626

    人;III期腺癌

    来源于子房组织;上皮细胞;贴壁;致癌Leibovitz的 L-15 培养基加入10%胎牛血清FBS

    TOV-21G

    人;3级,III期,原发性恶性腺癌; 透明细胞癌

    来源于:子房;上皮细胞;贴壁;致癌含有1.5g / L碳酸氢钠的MCDB105培养基和含有2.2g / L碳酸氢钠的199培养基以1:1混合。再加入15%胎牛血清FBS

    致病基因:p53 +(野生型)

    表达角蛋白基因

    UACC-1598

    人;4级囊腺癌

    来源于子房组织;上皮细胞样;贴壁Leibovitz的L-15培养基加入转铁蛋白0.01 mg / ml;0.01 mg / ml胰岛素;5μg/ mL(55 U / ml)过氧化氢酶;3.6μg/ mL(0.01 mM)氢化可(啲)的松;70μg/ mL(0.5mM)邻磷酸乙醇胺;10 ng / ml人重组表皮生长因子(EGF);3 ng / ml(0.01μM)雌二醇;0.8 ng / ml(1 pM)Na-L-甲状腺素;额外的2 mM谷氨酰胺和5%胎牛血清FBS

    受体表达:低表达表皮细胞生长因子受体

    致病基因:表达N-myc, 真核翻译起始因子5A2(eIF-5A2);低表达c-erbB2; 不表达ras

    表达基因:不表达细胞角蛋白(MAK-6),黄体酮,ras;低表达c-erbB2;表达N-myc, 真核翻译起始因子5A2(eIF-5A2)。

    UWB1.289

    人;卵巢癌

    上皮细胞样;贴壁

    50%的RPMI-1640培养基和50%的MEGM(来自Clonetics / Lonza的乳腺上皮生长培养基(MEGM Bullet   Kit; CC-3150)由MEBM基础培养基和SingleQuot添加剂制成(ATCC不使用庆大霉素 - 两性霉素B)。加入3%胎牛血清FBS

    注意:不要过滤完全培养基。

    表达致病基因:p53

    表达抗体:表达细胞角蛋白7(CK-7),钙网膜蛋白,Wilms的肿瘤蛋白(WT);不表达BRCA1

    表达受体:不表达雌激素和黄体酮

    UACC-2727上皮样,贴壁

    90%L-15(MD1100)+5%FBS(SD0200)+0.01 mg/ml transferrin+0.01 mg/ml insulin+5 µg/mL (55 U/ml) catalase+3.6 µg/mL (0.01 mM) hydrocortisone+70 µg/mL (0.5mM) o-phosphoethanolamine+10 ng/ml human recombinant epidermal growth factor (EGF)+3 ng/ml (0.01 µM) estradiol +0.8 ng/ml (1 pM) Na-L-thyroxine+2 mM glutamine+G/A (SD0038)

    定制完全培养基:L-15完全培养基(货号:MD0000)

    气相:空气,100%;二氧化碳,0%。温度:37摄氏度

    冻存条件/Cryopreservation:基础培养基+5%DMSO+20%FBS

    完全冻存液:无血清细胞冻存液(SD0002)

    her2/neu(+);EGFR(+);N-myc(+)MAK-6(+)




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