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    qPCR中的绝对定量是什么?

    发布时间: 2021-10-14  点击次数: 676次

    绝对定量目的是使用PCR测定目的基因在样本中的数量,即拷贝数。


    在绝对定量中,想要得到目的基因的拷贝数,需要制作标准曲线图。制作标准曲线图需要将标准品稀释至不同浓度,作为模板进行PCR。标准品是已知浓度的模板。


    结束PCR后,以测得的CT值为纵坐标,标准品浓度的对数值为横坐标,绘制标准曲线图。


    对待测样品的目的基因进行检测时,只需要将得到的CT值代入标准曲线图,即可计算出样品中目的基因的拷贝数。


    需要注意的是:

    1、标准品必须来源可靠、浓度已知

    2、标准品要和待测样品要同时在仪器中扩增

    3、只能根据标准品覆盖的浓度范围,进行样品浓度的推测

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