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    为什么细胞会抱团?因为天气冷了?

    发布时间: 2021-12-09  点击次数: 1448次

    是否总是遇到细胞抱团的现象?是否总是因为搞不清楚细胞抱团原因而困惑?是否总是因为难以将抱团细胞拯救回来而抓狂?童鞋们,我来拯救你们的细胞了,今天给大家从四个层面剖析细胞抱团的真实原因,快来围观吧!


    一、细胞本身生长特性有抱团倾向

    有些细胞本身有抱团生长的特性,给大家看五种喜欢抱团的细胞类型:


    细胞类型①:NCI-H716 人结直肠腺癌细胞

    形态:淋巴母细胞样

    生长特性:悬浮生长


    图片
    细胞喜欢在悬浮液中呈葡萄状聚集,抱团细胞粒粒饱满


    细胞类型②:Caco-2人结直肠腺癌细胞

    形态:上皮样

    生长特性:贴壁生长


    图片
    此细胞喜欢贴壁成片分布,呈融合状,细胞个头大小不匀


    细胞类型③:CaLu-3 人肺癌细胞

    形态:上皮样

    生长特性:贴壁生长


    图片
    此细胞也是喜欢聚集分布,呈片状,片状之间有空白



    细胞类型④:SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞

    形态:上皮样

    生长特性:贴壁和悬浮生长


    图片
    此细胞贴壁居多,有轻微的抱团倾向



    细胞类型⑤:BT-474人乳腺癌细胞

    形态:上皮样

    生长特性:贴壁、片状生长


    图片
    此细胞也是喜欢片状生长



    除了有喜欢抱团的细胞类型,也会有喜欢分散生长的细胞类型,来给大家展示二种细胞类型:

    细胞类型①:MSC(人源脂肪来源)

    形态:成纤维样

    生长特性:贴壁生长


    图片
    此细胞成纤维样,均匀分布,平铺皿底,不留空隙



    细胞类型②:HEF小儿包皮成纤维细胞(人源脂肪来源)

    形态:成纤维样

    生长特性:贴壁生长


    图片
    此细胞也是喜欢分散生长,均匀分布



    大多数上皮样或神经母细胞瘤样的细胞更喜欢抱团生长,而大多数成纤维样细胞更喜欢分散、均匀生长。


    又有一个问题来了,那就是我们如何区分细胞抱团正不正常。

    这里开始划重点了,大家看好了:

    1. 如果细胞本身是分散生长,结果抱团严重,说明细胞“生病"了,我们要给细胞“诊治"。

    2. 如果本身生长特性就有抱团的细胞,如何判断它的抱团正不正常呢?


    这里小编告诉您,细胞哪怕是抱团了,也是“粒粒饱满,棱角分明"的,回头看看上面抱团的细胞,是不是细胞之间有明确的“分界线",这说明它们抱在一起很健康;而异常的细胞抱团,你是观察不到细胞之间的“界限"的,细胞形态也不规则,边缘模糊,远远看去,抱团的细胞像“一团浆糊"。



    二、细胞老化更容易抱团 


    细胞类型:MSC(人源脐带来源第6代)

    形态:成纤维样

    生长特性:贴壁生长

    图片
    如图所示:

    人脐带来源第6代的间充质干细胞,白色箭头指示的是发生细胞老化的MSC细胞,β-半乳糖苷酶染色阳性,染上蓝色。由图片可以看出老化细胞体积增大、细胞扁平。白圈圈起来的是聚团细胞,老化细胞容易聚团生长,状态变差。


    三、血清批间差可能导致细胞抱团 

    那么问题来了,血清为何有批间差?

    因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,且血清组成及含量常随供血动物的年龄、生理条件和营养条件而异。每个批号的组分百分比含量都是不固定的,所以批间差异是存在的。

    图片

    H9c2 低密度正常形态

    旧批次血清


    图片

    H9c2 低密度抱团形态

    新批次血清


    图片

    H9c2高密度异常形态

    旧批次血清


    图片

    H9c2高密度异常形态

    新批次血清


    血清批间差可能会导致细胞抱团。

    如图所示,大鼠心肌细胞在更换了新批次的血清之后,随着传代次数的增加,抱团明显。正常低密度下,细胞舒展开来,均匀分散,但异常的的细胞会呈现聚集生长状态,高密度下正常细胞像铺路石一样均匀铺满,不留空隙,但高密度下异常的细胞,形态模糊,难以辨认,像四川九寨沟一样的沟壑重生。


    四、胰酶消化不当容易导致细胞抱团 

    图片

    HEK293细胞


    导致细胞抱团的第一种情况是胰酶消化操作不当。

    如果您经常遇到传代的细胞贴壁后老是贴壁不匀,成片分布,抱团生长,来看看你有没有注意这几个细节噢。

    1、如图所示,HEK 293因消化过度或吹打过猛导致细胞受伤严重,破损的细胞碎片容易粘连抱团;

    2、消化时细胞融合率太高,成片脱落,将不容易被吹散,容易抱团,我们建议细胞融合率达到80%传代为佳;

    3、吹打力度不足,难以将成片脱落的细胞吹散,容易抱团。



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