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细胞培养常遇问题集锦(十七)
发布时间: 2021-12-23 点击次数: 1128次细胞培养问题集锦第十七期,小编会继续收集相关问题,每期都为大家更新5个细胞培养中遇到的问题并解答~
81、
▲问:hepg2细胞有很多小球聚集到一起,这是污染还是没有吹开的细胞?是不是念珠菌感染?出不来形态,吹不匀。
答:肝癌就是这样,很容易坨,肝癌会有一个聚集成团,一片一片的clone,也会成聚集,推荐是带丙酮酸钠的MEM。
82、
问:细胞培养中加入biotin有什么作用呢?
答:是为了促进细胞增殖。
83、
▲问:细胞转了敲低基因的病毒之后,为什么总会出现一些比细胞还要亮的,碎片样的东西,或者圆形的东西呢?
答:基因的表达包括 GFP用,都会用泊松分布Poisson distribution的形式出现, 有些细胞有多一点GFP的表达, 有些少的。圆形的细胞是因为基因蛋白表达较高 ,所以荧光蛋白表达都高。
▲问:这种很亮的碎片呢?感觉他不像是细胞的样子!
答:细胞开始细胞凋亡,可能是凋亡小体,可用DAPI。
84、
问:细胞刚复苏都是亮亮的圆点是什么原因?之前复苏长得很快。
答:是不是还没贴壁?
问:之前两天都长满贴壁了,这次也两天了只有一点细胞贴壁。
答:复苏率不高,是不是没冻好?
问:之前别人冻的,需要重新复苏吗?
答:如果培养基和血清养别的没问题,那不太可能是营养体系问题。可能是冻存环节出现问题,传代后不会有好转,看看细胞能增殖出来不,增殖不出来就需要重新复苏了。
85、
▲问:请问上面三个图里,细胞是染菌了吗?昨天给单独加了100ul过滤的bi血清。
答:从照片上看黑点的形态高倍数放大是球菌,低倍数放大它们是立体聚集在一起,疑似是葡萄球菌。平面聚集的是链球菌。
问:黑点是不会动的,用三抗可以吗,还有救吗?
答:细胞还有库存的话建议重新复苏,因为细胞感染了,去除要花多些时间。
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