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    如何提高肿瘤细胞培养存活率和生长率?

    发布时间: 2022-10-20  点击次数: 167次

    原理

    根据人们的经验,肿瘤细胞在体外不易培养,建立能传代的肿瘤细胞系更为困难。

    当肿瘤组织或细胞初代接种培养后,常出现以下几种情况:


    1.  *无细胞游出或移动;

    2.  有细胞移动和游出,但无细胞增殖,细胞长时间处于停滞状态以致难以传代;

    3.  有细胞增殖,传若干代后停止生长或衰退死亡;

    4.  传数代后细胞增殖缓慢,经过一段停滞期后,才又呈旺盛生长状态,形成稳定生长的肿瘤传代细胞系。

    以上现象说明肿瘤细胞对体外生存条件有较高的要求,并需经过对新环境的适应才能生长,因此欲获得好的培养效果,不能局限于一般培养法,必须采用一些特殊的措施。


    材料与仪器

    瘤组织
    Hanks
    棉球

    步骤

    一、适宜底物


    如:把经过纯化的细胞接种在不同的底物上,如鼠尾胶原底层、饲细胞层等。

    二、生长因子

    应用促细胞生长因子,向培养液中增加一种或几种促细胞生长因子。根据细胞种类不同选用不同的促生长物,常用有胰岛素、氢化可的松、雌激素以及其它生长因子。

    三、动物体媒介培养

    为提高肿瘤细胞对体外培养环境的适应力和增加有活力癌细胞(干细胞)的数量,可采用动物体转嫁接种成瘤后,再从动物体内取出进行培养,能提高体外培养的成功率。受体动物以裸鼠最好。

    1.  瘤块接种

    取新鲜瘤组织,用Hanks液洗净血污,切成1~3 毫米小块,用穿刺针头吸一小瘤块,用酒精棉球擦拭动物腋部后,直接刺入皮下,注入瘤块。

    2.  饲养观察,待肿瘤生长达较大体积后,剥取出瘤组织。

    3.  进行体外培养。

    4.  为防止失败,仍取部分瘤组织继续在裸鼠体内传代。通过裸鼠媒介接种,有活力的肿瘤细胞数量增多,细胞培养易于成功。
     
    肿瘤细胞培养方法与培养正常细胞*相同,但成功率比正常细胞高。


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