Starvio siRNA转染实验指南--细胞状态

RNA转染实验的影响因素有很多，而细胞状态往往是同学们最容易忽略的一点。如果细胞状态差，那么转染时就会出现细胞死亡、转染效率低下等结果。那么关于细胞状态，我们应该注意些什么呢？

一、使用冻存复苏后，已传了两三代的细胞
刚刚复苏的细胞十分脆弱，稍有不慎就会死亡，因此一切接触细胞的动作都要尽可能地轻柔。一般而言，细胞在冻存复苏后的一两代之内或直到它们全部复苏之前都很难转染。建议在传代2-3代后再进行实验，此时的细胞从解冻过程中恢复过来，并恢复正常的生长速度，状态较为稳定。

二、细胞生长旺盛，形态正常
1、通常情况下，细胞在快速增殖时转染效率较高，但在停滞或死亡时转染效率明显下降，因而进行小核酸转染实验时，细胞应该处于对数生长期，同时细胞比活性应保持在90%以上，这样才能获得较好的转染效率。
2、其次，细胞具有多种多样的形态，我们在使用细胞时，一定要牢记它本来的形态，如球形、杆状、星形、多角形、梭形、圆柱形等，这样才能及时发现细胞是否已经变异，或是培养环境条件（密度、PH、培养基、微生物污染等）是否影响细胞正常生长。

三、注意细胞污染问题
1、细胞污染一般是由于操作不规范或无菌措施不到位等引起的，如真菌、细菌、支原体、黑胶虫、病毒、细胞交叉污染等，继而导致不同程度的细胞退化、活性下降、生长变缓、甚至细胞死亡。
2、如果发现细胞污染，须立即停止实验并及时处理污染源，以免造成更大的影响。切勿急功近利，使用受污染的细胞，否则会造成实验数据的错误、影响实验结果的准确性和可靠性。

以上就是针对于siRNA转染实验有关于细胞状态需要注意的方面。要知道无论是什么科研，好的实验材料才能铸就好的实验结果，希望大家可以重视起来，切莫因小失大！

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