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    WB实验详细步骤及用到的相关试剂汇总

    发布时间: 2024-06-17  点击次数: 359次

    以下是 WB 实验的详细步骤及相关试剂耗材汇总:


    一、实验步骤

    1. 蛋白提取:使用适当的裂解液提取蛋白。
    2. 蛋白定量:采用 Bradford 法或 BCA 法等测定蛋白浓度。
    3. SDS-PAGE 电泳:配制分离胶和浓缩胶,上样进行电泳。
    4. 转膜:将蛋白从凝胶转移到 PVDF 或 NC 膜上。
    5. 封闭:用封闭液封闭膜。
    6. 一抗孵育:加入一抗,室温或 4℃孵育。
    7. 洗涤:用洗涤液多次洗涤膜。
    8. 二抗孵育:加入相应的二抗,孵育后洗涤。
    9. 显色:使用化学发光试剂显色,曝光并成像。

    二、试剂耗材

    1. 试剂:裂解液、PBS、蛋白上样缓冲液、电泳缓冲液、转膜缓冲液、封闭液、一抗、二抗、化学发光试剂等。
    2. 耗材:移液器及枪头、离心管、培养皿、电泳槽、转膜装置、PVDF 膜或 NC 膜等。

    需要注意的是,具体的实验步骤和试剂耗材可能因实验条件和要求的不同而有所差异。在实验过程中,要严格按照操作规范进行,以确保实验结果的准确性和可靠性。


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