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    进口胎牛血清实验时出现的黑点是怎么回事?

    发布时间: 2021-12-04  点击次数: 285次
       进口胎牛血清FBS是细胞培养中使用最多的生长因子,因为它含有高水平的营养,用于哺乳动物细胞培养以生产抗体、抗原、干细胞和疫苗的含血清和血清减少培养基的配制。用于免疫测定和印迹的封闭剂,所有胎牛血清都是完全可追溯的,并且来自经过审核的供应商。在单独容器中处理FBS,并对其进行三次0.1μ无菌过滤,消除了任何交叉污染的可能性。
      胎牛血清细胞培养过程中一旦发现有黑点出现,首先要肉眼观察培养基是否混浊;然后在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
      如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么可能与以下几种情况有关:
      1.细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
      2.血清质量不好,反复冻融的结果;
      3.配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;
      4.配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
      5.培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
      胎牛血清细胞培养中如何防止黑点出现:
      1.尽可能减少血清冻融次数;
      2.培养基无需37℃水浴;
      3.培养基保持最佳PH值7.0-7.2;
      4.严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗;
      5.掌握细胞传代的理想时机,细胞切勿生长过老。
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