销售热线

19126518388
  • 技术文章ARTICLE

    您当前的位置:首页 > 技术文章 > Thp-1细胞高效率转染条件分享

    Thp-1细胞高效率转染条件分享

    发布时间: 2021-08-23  点击次数: 236次

    一、转染材料准备

    1. 转染试剂用量:10ul

    2. siRNA浓度:20um/L

    3. 细胞密度:1*106-1*105

    4. 转染用培养板:6孔板

    5. 转染试剂:Advanced DNA RNA转染试剂;

                         货号:AD600025

    6. 转染时间:48小时

    7. 细胞培养胎牛血清:Z7180FBS-500超低内毒素胎牛血清

    8. 细胞冻存液:L0100无血清细胞冻存液.

    注意:本细胞转染用量条件不适合lipo使用。

    Thp-1细胞高效率转染条件分享

    操作过程:

    1.提前1天接种细胞:细胞汇合度在60-80%左右,再进行转染。

    2. 核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照比例关系直接混合,用移液器吹打、混匀,室温静止15分钟。

    3.在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基里面可以含有血清。

    4.细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。

    5.分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达。若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达。

    二、转染试剂产品介绍

    Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂,此技术成为新的全球蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。

    三、优秀表现

    Zeta Life多肽小分子转染试剂尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;

    本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞;

    本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力;

    不激活细胞表面或细胞体内marker;

    可反映真实的细胞通路蛋白原始数据;

    可转染免疫细胞、悬浮细胞等。

    Thp-1细胞高效率转染条件分享


在线咨询
咨询热线

0759-5588931

[关闭]