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    细胞培养之“黑胶虫”的防治

    发布时间: 2021-09-26  点击次数: 781次

    “黑胶虫"/“Nanobacteria"究竟是何方神圣?《生物化学与生物物理进展》杂志(PIBB)2020年第1期发表了题为细胞培养中“黑胶虫"污染的检测及防治一文。根据作者描述,“黑胶虫"污染具有以下特征:

    1. 培养基和正常培养基没有区别;

    2. 低倍镜下它是黑色的点点和细胞碎片没有区别

    3. 高倍镜下它会做运动给你看,也能模仿细胞碎片和细胞分泌物的布朗运动。还有黑胶虫“路痴"到处跑的。

    4. 与细胞的数量成反比,细胞越多,它越少,细胞越少它越多

    5. 细胞状态越养越差。


    该科研成果除了得出这些结论外,还成功的鉴定出“黑胶虫"为缺陷短波单胞菌属新菌株,连名字都有了叫:Brevundimonas sp. GYBL3。

    当然也有实验结果表示:初感染黑胶虫对细胞和实验都没有影响,但是后续细胞生长越来越慢,甚至停滞不长,黑点越来越多,直到细胞“全军覆没"。


    黑胶虫的防治:

    1、尽量使用好的血清,但是好的血清一般价格高的离谱,经济条件不允许,也可以选用进口新生牛血清代替。建议如果使用的是好的血清可不必灭活,这样可以减少“小黑点"的形成。

    2、如果是贴壁细胞的话,可用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。若是悬浮的话,就不太好处理啦,可以向其中少加一点滋养细胞。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效!要是复苏很久的细胞,那就用PBS反复离心几次 ,一般建议是800-1000转3分钟, 离心2到3次,重新种植,加四环素等抗黑胶虫的药物进行抑制,让细胞尽快长起来,黑胶虫就消失了。

    3、换用信得过的塑料培养瓶。

    4、停止复苏,停止养细胞,彻底消毒所有用于细胞培养的一切用品,包括所用的培养瓶,培养基,吸管,胰酶,孵箱,超净台、空间等等你能想到的和细胞培养相关的所有物品,当然也别忘了您的白大褂。

    5、如果有其它可用的细胞,那么污染的细胞最好扔掉;如没有,可试着用氯霉素 ,红霉素,或四环素进行抑制,或选用黑胶虫抑制剂。

    6、minocycline具有抑制的作用,可以在换液的时候使用。由于黑胶虫尚未明确鉴定出是什么生物,所以上述的处理方法不一定正确,可以供考虑采用。



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