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    电穿孔法转染如此“万能”,为什么还要用其他方法?

    发布时间: 2021-10-09  点击次数: 1557次

    同学们在进行转染时,肯定被各种各样的转染试剂挑花了眼吧。商业化的转染试剂通常针对多重细胞类型、不同的核酸和各种特定的用途,也就是说,你要从种类繁多的试剂中挑选适合你的。


    这时候,电穿孔法转染就进入了我们的视野。


    电穿孔法转染原理是通过脉冲电场,使得细胞膜上产生小孔,通透性被暂时的提高。周围的小分子穿过小孔,扩散到细胞内。理论上说,电穿孔法转染是可以对任何细胞进行转染,可以转染DNA、RNA、蛋白、糖类等,也不需要特殊的试剂。


    但为什么还是有很多实验者选择了脂质体介导法等方案呢?原因如下

    1、电穿孔法虽然不需要特殊试剂,但需要购买昂贵的电转仪。


    2、电穿孔法转染会杀死细胞,因此需要较多的细胞和外源分子。


    3、电穿孔法对实验者的操作水平要求较高。过低的电场强度、过长的电脉冲时间,会裂解细胞;电压过低,过短的电脉冲时间则会降低转染效率。


    因此,电穿孔法不是真正的“万能",实验上也需要多学习、优化。


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