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    生化转染的另一种选择,磷酸钙介导的转染

    发布时间: 2021-10-11  点击次数: 436次

    磷酸钙介导的转染方法应用于将外源DNA转入培养的细胞,已有45年以上的历史。Graham和van der Eb在磷酸钙存在下,将病毒DNA导入哺乳动物细胞的这一工作,为基因在多种哺乳动物细胞中进行瞬时表达奠定基础。


    因此,即使脂质体介导的转染方法是我们首先选择,依然有很多实验员在使用磷酸钙介导的转染。


    他的主要原理是,磷酸钙与DNA形成不可溶的沉淀物,即磷酸钙-DNA复合物,吸附于细胞膜表面,通过细胞的内吞作用或吞噬作用,进入细胞中。磷酸钙起到促进DNA进入的细胞的作用。


    磷酸钙介导的转染方法的优点:

    1、细胞毒性低

    2、可转染大质粒

    3、操作简单

    4、成本非常低廉。


    但具有以下缺点:

    1、由于试剂的PH值对沉淀形成有巨大影响,对于不同核酸需要调整方案

    2、有时会表现出免疫原性

    3、对原代细胞无效

    4、不能在细胞培养基中制备转染复合物。


    在使用上有很多需要注意的地方,这可能也是在生化方法中,脂质的优先级别更高的理由


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