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    AO染色法(丫啶橙染色法)检测细胞凋亡

    发布时间: 2021-11-01  点击次数: 1103次
    材料与仪器

    【试剂】pH4.8~6.0 Tritionx-100的PBS缓冲液, AO染料:将AO染料溶于含1%TritionX-100的PBS中,终浓度为6μg/ml,含Rnase100μg/ml,避光保存。 【仪器】荧光显微镜

    实验步骤

    制备活细胞悬液106 /ml; 取95μl细胞悬液,加5μl的AO染液混合、避光作用10min; 加入5ml PBS,1500r/min离心5min,弃上清,重复洗涤2次; 重悬细胞,吸一滴滴于玻片上并用盖玻片封片;

    要点

    在荧光显微镜下,选用515nm激发光镜检:AO染色细胞DNA呈黄色或黄绿色。当细胞凋亡时,染色呈致密浓染的黄绿色荧光或见黄绿色碎片。


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