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    补体介导的细胞毒试验

    发布时间: 2021-11-01  点击次数: 177次
    材料与仪器

    小鼠
    Hank's液 抗小鼠Thy-1的单克隆抗体 补体 伊红-Y染液
    解剖器械 平皿 不锈钢网 试管 吸量管 尖吸管 载玻片 盖玻片

    实验步骤

    1.  小鼠胸腺细胞悬液的制备
     

    将 4~6 周龄小鼠采用颈椎脱臼法处死,取出胸腺放入已加入约4 ml冷Hank's液的平皿中,在100 目的不锈钢网上研磨后,过筛,放入试管,离心1000 rpm,5 分钟,用Hank’s液洗两次。将沉淀的细胞重悬于Hank's液中,配成1×107 /ml细胞悬液。
     
    2.  取试管3 支,标明顺序,依据下表依次加入1×107 /ml胸腺细胞悬液、抗小鼠Thy-1 的单克隆抗体(最适稀释度)及Hank's液,放入37 ℃水浴30 分钟。



    3.  取出后每管加入1 %伊红-Y 染液1 滴,混匀,室温放置2 分钟。
     
    4.  重新混匀后分别在一张载玻片上滴片,加盖玻片镜检。先在低倍镜下观察,再用高倍镜观察,比较3 管中细胞死活情况。



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