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    细胞转染后总是污染,该如何处理?

    发布时间: 2021-11-12  点击次数: 2169次

    有部分同学在做转染时,总会有这样的疑问:细胞养着没问题,铺板第二天也没问题,状态都很好,然后转染第二天早上看就污染了,已经重复三次了,回回都是这样,为啥呀?提的质粒用0.45um滤膜过滤了,别的实验也用了,没问题。铺板剩下的细胞放在t25养了,至今状态都还很好,只有六孔板里面的污染了,百思不得其解……


    针对这方面问题,以下小编整理出几个解决方案:

    1、建议换个液看看,看看镜头里面的图片,像不像典型的污染?如不太像典型污染,那如果液体不澄清,背景脏,那可能真的是污染。没事儿,正常换液,主要操作的时候别与其他细胞一起操作。每次换液的时候,先用双抗原液清洗一下细胞。就算是细菌污染也不太要紧,一般通过抗生素洗涤和换液频率都能够挽救回来。当然了,如果你的细胞不是很珍贵,那你要评估一下有没有挽救的必要。

    2、可以试试用0.22um滤膜过滤。

    3、转染如果自己提质粒的话,一般也可不过滤, 用去内毒素大抽试剂盒提,大概每个样100块,转染后也没问题。

    4、有同学以前做的转染实验也是会污染,现在是在完培里面加了1%的双抗,就不会污染了。整个转染实验过程中只有配制转染试剂时用的纯DMEM,其他的给药和铺板都用含有双抗的完培。

    以上就是小编整理出来的几个答案,希望可以帮到广大同学,转染实验顺顺利利,发表的文章都能见刊~

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