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    细胞培养常遇问题集锦(六)

    发布时间: 2021-12-01  点击次数: 901次

    26、

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    ▲问:有时候细胞和细胞之间就会出现这种小黑点,高倍镜下看少数在原地打转,但是培养液不浑浊。那其中不会动的是细菌吗?

    答:原地打转的可能为黑胶虫,会动的是细菌,细菌有鞭毛。黑胶虫是一种现象,身份可能是细菌,有鞭毛会游动。

     

    27、

    问:想问一下,已经使用三抗以及抗支原体的药物培养细胞一周,但还是有少量黑胶虫,但细胞生长状态还好,这样的话接下来还需要处理嘛?好像有一种有少量黑胶虫但不影响细胞状态可以不做处理的说法?

    答:一周,黑胶虫数量减少,已经见效了,但还是要继续处理,因为黑胶虫和细胞有此消彼长的特点,细胞复苏或刚传代时,因为此时细胞状态差,所以特别容易爆发黑胶虫,黑胶虫数量增多,当细胞复苏率增强时,黑胶虫数量会减少。

     

    28、

    问:话说养细胞的时候,一直加双抗,会对哪些实验有影响呢?之前听说做干扰的时候,要撤双抗。

    答:一般做功能学实验,药理学,毒理学,信号通路都要撤掉双抗。

     

    29、

    问:Cho传代接种密度0.4 e5,4天才长到11e5,是怎么回事?DT从16.5变成20了。一直都用的一样的培养基,是不是冻溶会影响?是cho细胞,摇瓶培养。

    答:检查一下营养体系是不是不适合,如不是,那就考虑是胰酶消化这一步是不是有问题。你这边是把cho贴壁驯化成悬浮了。

     

    30、

    问:请问怎么培养破骨细胞?怎么提取到培养的protocol?遇到一个情况,怎么消化也消化不下来,想从源头找一找,是什么原因?

    答:破骨细胞的培养方法主要有:骨髓机械分离法,骨髓细胞诱导法,脾干细胞诱导法,血液单核细胞诱导法,小鼠RAW264.7细胞系诱导法及骨巨细胞瘤分离法。


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