实验病理学技术—冰冻切片详解剖析

童鞋们，今天来和大家聊聊实验病理学方面的技术——冰冻切片。

冰冻切片因为不涉及乙醇脱水、二甲苯透明等有机溶剂处理步骤，能较好保存组织内酶、糖及表面抗原的抗原性，是免疫组织化学和免疫荧光的常用切片方法。但是因为其切片厚度（8-10 µm）较石蜡切片（3-5 µm）厚，所以最后呈现的组织形态往往不如石蜡切片。

一般的操作步骤是将新鲜组织取出后，尽快埋入已有OCT（冰冻切片专用胶）的冷冻包埋盒内。然后放入液氮中速冻，之后移入-80摄氏度保存。如果需要马上切片，需要在冰冻切片机中平衡温度大概20-30分钟，再在-20摄氏度下进行冰冻切片。对于脂肪组织需要更低一些的温度，一般在-25摄氏度左右切片。

注意事项：

1.组织埋入OCT中需要展平，且OCT中不能有气泡；

2.取材的组织不能带有水分，否则容易形成冰晶，影响观察；

3.组织取材需迅速，骤冷速度快且均匀，但是骤冷时间不能过长，最好不要超过1分钟。

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