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原位裂解细胞的CAT分析法
发布时间： 2021-12-15 点击次数： 818次材料与仪器
转染细胞
Triton裂解液
培养皿 培养箱步骤
1. 60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞，用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低渗缓冲液，在室温下温育2~5 min。
2. 吸去低渗缓冲液，加入400 μl Triton裂解液。用橡胶刮子将细胞刮离培养血，用1 000 μl 移液器将裂解物移入1.5 ml 微量离心管中。
3. 微量离心1 min 除去细胞核，不可溶性蛋白。将上清转入一个干净的微量离心管中， 进行CAT活性分析。同实验其他方法
CAT活性的层析分析法
1. 100 mm 培养皿中的转染了CAT表达质粒的贴壁细胞，用PBS洗两次，每次5 ml每培养皿加入1 ml TEN溶液。将细胞置于冰浴5 min。 2. 用橡胶
CAT活性的相-抽提分析法
一、来源于哺乳动物细胞 1. 按“CAT活性的层析分析法"中的步骤1~5的冻融法，制备哺乳动物细胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制细胞方法来收集细胞，则将原位裂解法的步骤1至4用以下的步骤2
人生长激素的放射免疫分析法
1. 取转染了hGH表达质粒的哺乳动物细胞的培养液100~500 μl。 2. 加100 μl 培养液或标准品至12 mm×75 mm 圆底试管中。加入100 μl 125I-
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安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户，提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂；inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产，包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等，为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务；提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务，努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。
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