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    YAC 克隆的分析实验 实验库 参考来源:

    发布时间: 2021-12-24  点击次数: 247次

    材料与仪器


    酵母菌
    AHC YPD 甘油
    培养箱 冷冻管


    步骤


    1.  用接种棒将含重组载体pYAC的AB1380菌株划线接种在AHC平板上,倒扣平板于30℃培养,直至长出1~3 mm 大小的红色菌落为止。

    2.  短期保存:用Parafilm膜将平板周围封起来,于4℃可保存4~6周。

    3.  长期保存:接种一个单独的YAC克隆的菌落于3.2 ml YPD培养基中,在30℃摇床过夜,然后加入1 ml 80%甘油,混匀,再分成0.2~1.0  ml 小份将甘油/菌悬液移至冷冻管中,-80℃保存。


    同实验其他方法

    制备YAC DNA进行Southern印迹分析

    1.  接种一个红色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20 ml AHC培养基的250 ml 三角烧瓶中,在旋转摇床上30℃ 250 r/min 振荡培养24 h。   2.  扩大

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