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    斑点滤膜结合法

    发布时间: 2022-03-14  点击次数: 98次


    原理


    材料与仪器


    待测蛋白质样品
    10%三氯醋酸(TCA) 考马斯亮蓝凝胶染色液 考马斯亮蓝凝胶脱色液
    Whatman 3 MM 滤纸


    步骤



    1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格;


    2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品;


    3. 将滤纸凉干,大约需要 15 min;


    4. 将滤纸浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重复使用);


    5. 用水快速漂洗滤纸;


    6. 将滤纸浸入考马斯亮蓝凝胶染液中 30 s(染液可重复使用);


    7. 用水快速漂洗滤纸;


    8. 在考马斯亮蓝凝胶脱色液中使滤纸脱色,脱色在几分钟之内完成;


    9. 通过相应显蓝色的方格,可判断其含有一定量的蛋白质存在。



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