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    标签酶消化释放标签实验

    发布时间: 2022-03-24  点击次数: 120次

    材料与仪器

    溶液与缓冲液 LoTE
    Eppendorf 试管

    步骤


    实验方案 A

    1.向含有 Dynabeads 的每个试管中加入下列物质:

    2.65℃ 下酶解 Ih(每 IOmin 混合 1 次)。

    3.时收集上清液(含有释放的 cDNA 标签)

    4.用 LoTE 扩容到 200mL。

    5.等体积的 PCI 抽提,乙醇沉淀(实验方案 A,第 2 步)。

    6.将冲洗和风干后的沉淀重新悬浮于 10 ul LoTE 中。

    实验方案 B

    1.从 PCR 试管中移去连接反应混合物并用 50ul 洗液洗涤 1 次。

    2.从试管中移去冲洗液,加入 50 ul 的 1X 限制性缓冲液,然后移去限制性缓冲液。

    3.向试管中加入下列物质:

    4.在 65°C 下消化 lh。

    5.加入 175ul 的 LoTE 然后转移到 1.5 ml 的 Eppendorf 试管中。不要丢弃,因为混合物中含有所释放的附着于接头上的 SAGE 标签。

    6.如上所述,用等体积的 PCI 抽提,乙醇沉淀(实验方案 A,第 2 步)。

    7.将冲洗和风干后的沉淀重新悬浮于 21.5ul 的 LoTE 中。

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    安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户,提供独特细胞体内可代谢的核酸转染试剂;inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产,包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等,为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务;提供以植物生物为平台基因序列全人源化、独特的细胞培养可分解3D基质胶产品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务,努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业。



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