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    转化实验中,应选择什么PCR酶?

    发布时间: 2022-06-08  点击次数: 205次

    转化实验中,应选择什么PCR酶

    1. Taq酶
    2. 高保真酶


    这取决于你的克隆方案,是用平末端还是粘性末端。

    如果后续克隆用平末端连接,可以使用高保真酶,产生的末端就是就平末端,进行平末端连接。

    如果后续克隆用粘性末端,使用普通的Taq酶就可以了。Taq会在产物末端多带一个A尾巴,对应的载体是带T尾巴的T载体。

    如果在引物设计上,在PCR产物末端引入一些酶切位点序列,那么尾巴就会更长。加入尾巴时应考虑目的基因插入载体的方向,设计酶切位点序列尾巴。如果尾巴设计反了,插入的目的基因也是反方向的,就无法起效。



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