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免疫细胞转染实验失败了千万不要慌！
发布时间： 2022-11-03 点击次数： 592次免疫细胞转染在细胞生物学和分子生物学中占据重要地位，广泛用于基因与蛋白功能研究，成为实验室工作中的常规技术手段之一。没有一种方法适用于所有的细胞和实验，需要根据细胞类型和实验进行选择。理想的方法应具有高转染效率，低细胞毒性和对正常生理学的影响最小，并且易于使用和具有可重复性等特点。常用于哺乳动物细胞转染的方法有磷酸钙法、阳离子脂质体法、病毒转染法和电穿孔法。然而，免疫细胞转染实验出现失败也不要惊讶，常见的异常结果是细胞大量死亡、转染效率不高、重复实验不稳定。如何找到问题所在，让实验顺利进行，就显得比较重要。例如细胞转染实验失败导致细胞大量死亡如何处理我们根据以下的分析来针对性解决：1.细胞状态不佳：选择生长旺盛的细胞进行转染实验。2.核酸纯度不够或内毒素过高：采用高质量核酸与去内毒素的核酸。3.目的蛋白对细胞的毒性：尝试进行再设计。4.转染试剂过多：降低转染试剂的量；转染后4-6h换液。5.污染：排查污染源或重新复苏细胞。6.抗生素存在：特别是阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使抗生素可以进入细胞，降低细胞的活性，导致转染效率降低，可降低抗生素浓度或不使用抗生素。7.营养不足：如果无血清条件下转染的，要根据状态及时补充营养。- 下一篇：DAPI染DNA的原理及使用方法
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