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    细胞运动观察

    发布时间: 2023-01-12  点击次数: 65次

    简介

    纤毛与鞭毛是单细胞或多细胞生物细胞表面伸出的特化结构,其内部是由微管组成的轴(轴中央由 2 条微管组成,外围由 9 组二联微管环绕),轴的基部与基体相连,周围被细胞膜所包绕。直径为 0.15~0.3 μm,属于细胞的运动器官。其运动一般认为是由二联微管间的滑动所引起,鞭毛运动方式为波浪式、纤毛运动为波动式。

    原理

    细胞运动观察实验的基本原理是纤毛与鞭毛是单细胞或多细胞生物细胞表面伸出的特化结构,其内部是由微管组成的轴(轴中央由 2 条微管组成,外围由 9 组二联微管环绕),轴的基部与基体相连,周围被细胞膜所包绕。直径为 0.15~0.3 μm,属于细胞的运动器官。其运动一般认为是由二联微管间的滑动所引起,鞭毛运动方式为波浪式、纤毛运动为波动式。
    暗视野照明法是一种使照射被检物体的光线不直接进入物镜的照明方法。常用它观察未染色的活体细胞或胶体粒子。利用此法,在显微镜下观察时直接看不到通过标本的照明光线,而是被检物反射或衍射的光线进入物镜,可提高分辨率,在暗视野中可以看到明亮的被检物体的存在和运动,但它们的内部结构却看不清楚。

    材料与仪器

    器材:
    探针、蛙板、大头针、蜡屑、载玻片、盖玻片、解剖剪、镊子、牙签、吸管、平皿、普通光学显微镜、暗视野显微镜、蟾蜍。
    试剂:

    ①蟾蜍生理盐水。

    步骤

    基本过程可分为如下几步:

    (一)观察蟾蜍上颌黏膜上皮细胞的纤毛运动

    A 穿刺法处死蟾蜍 取蟾蜍 1 只,左手食指和中指夹住蟾蜍前肢,无名指和小指夹住后肢,大拇指压住头部,使头和躯干呈一定角度。孔手持解剖针,对准头和躯干背侧相连的凹陷处(即枕骨大孔),以穿刺法捣毁脑和脊髓。当蟾蜍四肢无力下垂时,即表明动物已死。
    B 将蟾蜍腹部向上、固定在蛙板上。
    C 沿蟾蜍两侧口角向后剪开约 1 cm,将下颌后翻固定在腹部。
    D 在上颌中线距喉头 1 cm 处放置蜡屑,观察蜡屑向什么方向移动?记录蜡屑开始移动到消失的时间。
    E 用眼科剪剪取喉头前部上颌黏膜组织约 4 mm x 4 mm 小块,用牙签挑取剪下的黏膜,将纵切面贴到载片上。
    F 加 1 滴生理盐水置载玻片的标本上,加盖玻片,光镜下观察。

    (二)暗视野观察蟾蜍精子的鞭毛运动

    A 将前面实验所用蟾蜍沿腹中线剪开,暴露出黄色圆柱状精巢。
    B 剪取一侧精巢放置盛有自来水的平皿中,用镊子夹住精巢的一端,清洗血污。
    C 取洗净的精巢放到另一干净的平皿上,用眼科剪将精巢充分剪碎后,加入数滴自来水,混匀。
    D 用吸管吸取平皿内液体,滴 1 滴于载玻片上,盖上盖玻片,稍待 2~3 min,镜下观察。

    注意事项

    1 蟾蜍上颌黏膜上皮细胞的纤毛运动 低倍镜下观察纤毛运动的现象,然后换高倍镜仔细观察纤毛有规律的运动。
    2 暗视野观察蟾蜍精子的鞭毛运动 低倍镜下可看到视野中有许多精子,头部呈长锥形,尾为细长的线状结构;高倍镜下,见有许多靠尾部鞭毛弯曲摆动驱使运动的精子。


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