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    兔源抗体

    发布时间: 2024-04-28  点击次数: 138次

    兔IgG只有一种亚型

    人和小鼠都有五种抗体类型(IgA,IgD,IgE,IgG,and IgM)。目前为止,已经在兔中发现其中的四种(IgA,IgE,IgG,and IgM)。有趣的是,人有两种IgA亚型,小鼠有一种,而兔子共有14种IgA亚型。


    研究用的抗体主要是IgG类型。兔只有一种IgG亚型,而小鼠有IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c和IgG3亚型,大鼠有IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG2c亚型。表一列出了兔抗体类型,亚型,基因名称及导向NCBI和IMGT基因数据库的链接。

    表一:兔抗体类型、亚型及相应基因

    抗体类型亚型NCBI登录号IMGT 基因名
    IgAIgA1, IgA2, IgA3, IgA4, IgA5, IgA6, IgA7, IgA8, IgA9, IgA10, IgA11, IgA12, IgA13, IgA14只以IgA1为例说明。 X51647IGHA
    IgE
    AY386696IGHE
    IgG
    L29172IGHG
    IgM
    J00666IGHM

    兔抗体分子量

    不同类型及不同亚型的抗体具有不同的分子量,因为1)链间二硫键的数目不同,2)链间二硫键引起的免疫球蛋白分子的寡聚化程度不同;3)重链区的免疫球蛋白域的数目不同。


    常见的兔IgG型的在非还原条件下分子量为150KD,含有两个重链(各约50KD)和两个轻链(各约25KD)。在还原条件下,重链和轻链的分子量分别为50和25KD。


    兔抗体的制备

    兔多克隆抗体的制备

    兔是多克隆抗体中主要的动物宿主,因为兔子个头小,繁殖周期短,与大部分研究用模式生物有较大的种间距,以及有非常成熟的抗体制备工艺。截止2014年12月10日,Labome抗体库汇集的308060兔多克隆抗体,分别靶向18302个人基因,13199个小鼠基因,及10923个大鼠基因。


    在抗体供应商中非常普遍(即,不同的供应商为同样的抗体试剂使用不同的产品目录号)。来邦网是一家努力减少重塑品牌的抗体试剂数量的平台。


    兔单克隆抗体的制备

    在过去的几十年里,人们一直在努力制备兔单克隆抗体。对于在啮齿动物中没有免疫原性的抗原来说,这种方法是特别重要的。最初是通过c-myc和v-abl的转基因兔子产生浆细胞瘤细胞系,进而得到兔单克隆抗体。目前一些公司主要是利用专用技术生产兔单抗。截止2012年12月10日, Labome抗体库汇集的18692兔单克隆抗体, 分别靶向3112个人基因, 2149个小鼠基因, 及1814个大鼠基因。

    兔单抗和小鼠单抗的优劣对比

    已有数个研究来比较兔单抗(RabMAb)和小鼠单抗的特点。2005年, Sabrina Rossi等发表了一组比较研究,以多种肿瘤组织和正常组织为实验材料,检测常规的免疫组化诊断中雌激素受体, 孕激素受体, Ki-67, cyclin D1, CD3, CD5, CD23, 和synaptophysin的兔单抗和小鼠单抗的染色情况。结果表明,和小鼠单抗相比,兔单抗具有相似的特异性,且具有较高的灵敏度,这允许兔单抗有较高的稀释比(平均5到10倍);此外,一些情况下,为了达到更好的染色效果,也不需要抗原修复操作 。2008年,Rafael Rocha et al.的研究也支持这一结论 。但是,Jose G. Vilches-Moure 和 Jose A. Ramos-Vara 以甲醛固定,石蜡包埋的犬组织为实验材料,发现兔单抗和小鼠单抗都识别COX-2, Ki67, synaptophysin, 和vimentin;但是,只有兔单抗能检测出CD3, chromogranin A, 和孕激素受体, 而只有小鼠单抗能检测出CD79a, calcitonin, 和雌激素受体

    抗兔的二抗

    Labome的调查 二抗表明,山羊、绵羊和驴都是制备抗兔二抗的常用宿主。

    抗兔基因的抗体

    虽不像啮齿动物那样常用,兔也是一种非常有研究价值的动物。兔子是研究肿瘤发生, 损伤和创伤修复, 及其它一些应用的很好的模式生物。

    兔网织红细胞裂解液常用于体外无细胞翻译体系 。截止2012年12月10日,Labome抗体库汇集了靶向38个兔基因的单抗,36个兔基因的多抗。

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