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    细胞被支原体污染怎么办?

    发布时间: 2024-04-29  点击次数: 143次

    支原体是什么?如何判断细胞是否被支原体感染?如果感染了,细胞应该如何处理?

    以上三个问题,大多数养细胞的同学都会遇到,我们今天就讲一下支原体污染的问题。

    细胞被支原体污染怎么办?


    支原体,是一种没有细胞壁结构,在独立生活和细胞内寄生之间存活的原核生物,其结构和典型的细菌相近。

    部分支原体可以致病,例如肺部支原体。由于支原体没有细胞壁,许多常见的抗生素,如青霉素对其没有杀伤力。

    和常见的细菌污染不同,细胞被支原体污染后,采用常规显微镜无法直接在明场视野下看到支原体,后者也并不会直接破坏宿主细胞结构,而是改变细胞的代谢。

    所以,细胞往往表现出生长状态变差,例如生长缓慢,不像细菌污染那样大量死亡。因此,被支原体污染的细胞是很难察觉出异样的。

    细胞被支原体污染怎么办?

    那么,如何判断细胞是否被支原体污染呢?

    常用的方法有荧光染色、PCR、ELISA、免疫染色、放射自显影以及微生物学分析。

    对于大多数同学而言,最简的办法,应该是采用荧光染色。具体来说,就是使用Hoechst 33258对细胞进行染色。

    其原理是被染色后的细胞,在50X或100X目镜下观察,可以看到细胞核呈蓝色荧光,细胞内染色质上有明确的蓝色荧光微粒或丝状物,后者就是支原体的标志特征。

    细胞被支原体污染怎么办?

    动物细胞培养 第7版 配图

    使用Hoechst 33258进行染色的实验方法见下图(参考资料:动物细胞培养 第7版

    如果实验室有条件的同学,也可以直接购买商业化的检测试剂盒,这样会更加方便和高效。

    细胞被支原体污染怎么办?

    我们之前讲过,如果细胞被微生物污染,例如细菌,那么应该直接把被污染的细胞清理掉,而不是尝试挽救。

    同理,当细胞被确认感染了支原体后,第一选择的处理措施依然也是清理掉污染的细胞。

    除非该细胞非常重要,或无法替代,此时我们可以尝试去除支原体污染。以下,我们也为大家分享支原体清除的实验操作建议。(参考资料:动物细胞培养 第7版)

    细胞被支原体污染怎么办?

    细胞被支原体污染怎么办?

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