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    免疫细胞转染若转染效率不高的改进方式

    发布时间: 2022-01-01  点击次数: 153次
       免疫细胞转染试剂是一种新开发的试剂,用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中。Zeta Life多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10。本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞,进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力,不激活细胞表面或细胞体内marker,可反映真实的细胞通路蛋白原始数据,可转染免疫细胞、悬浮细胞等。
      免疫细胞转染时应使用优质质粒:
      1.通过测量OD值来确定DNA纯度和浓度,测得的OD值应介于1.7-1.9之间。脂质体转染基于电荷吸引原理,如果DNA不纯,如带少量的盐离子、蛋白、代谢物污染都会显著影响转染复合物的有效形成及转染的进行。
      2.含有内毒素的质粒对细胞有很大的毒性作用。转染时,小心轻柔的将lipo2000加到培养基中并轻轻混匀,避免粗暴用力吹打,会导致脂质体失效。
      免疫细胞转染后发现转染效率不高,可以通过两种方法改进:
      1.复转染,即转染后12-24小时再次进行转染,前提是该细胞对脂质体的耐受性较好,转染后细胞死亡数较少。
      2.通过药筛来杀死未转入成功的细胞。前提是该质粒带有抗生素抗性的基因。
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