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    无血清培养基更换后细胞大量死亡的原因探究

    发布时间: 2022-02-14  点击次数: 115次
       无血清培养基(SFM)是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基。但是它们可能包含个别蛋白或大量蛋白组分。虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求,但对有些实验却不适合,如观察一种生长因子对某种细胞的作用,这时需要排除其他生长因子的干扰作用。而血清中可能含有各种生长因子;又如需要测定某种细胞在培养过程中分泌某种物质(抗体、生长因子)的能力;或者要大规模的培养某种细胞,以获得它们的分泌产物。因此研制出无血清培养基一直是生物科学工作者努力的目标。
      科研实验使用转染细胞在转染前要换上无血清培养基。本来条件好好的,转染效率也可以接受。但是过了一段时间就发生了细胞在有血清的培养基中长的好好的,一换无血清的培养基就死亡的现象。大概4个小时就能看到较多的细胞飘起来。换了不同批次的培养基,但仍不行,这是怎么回事呢?
      解析:
      1.两周后的培养液应补加谷氨酰胺,或者重新配液,转染时应不含抗生素。
      2.确认操作方法和环境,建议检查一下。
      3.脂质体的毒性很大,如果有质粒参与对细胞损伤更大,如果在常温放置过,对细胞更大,假期冰箱是否断过电。
      4.培养箱的温度、CO2浓度,湿度等。
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