细胞为何总是抱团生长？

细胞为啥总是一言不合就抱团生长？！

是细胞污染了还是正常现象？

是消化不好了还是铺板有问题？

抱团细胞越来越多，怎么样才能让细胞分开生长？

请认真阅读以下干货，看看能否帮您答疑解惑！

细胞抱团一定代表细胞状态不好吗？

▲RAW264.7细胞-正常状态

▲RAW264.7细胞-异常状态

▲H9c2细胞-正常状态

▲H9c2细胞-异常状态

3、细胞抱团是因为细胞污染了吗？一般细胞培养液清亮，就不是污染。如果是污染了的话，可以通过观察培养液颜色，若污染，则很浑浊。

细胞为啥总是喜欢抱团？

• 细胞死亡释放出DNA，缠绕其他细胞，形成黏性的细胞团（消化的过程可能过于粗暴，吹打太用力，消化太久，消化液太强或有毒性等）。

• 细胞离心速度过大或时间太长。

• 消化不*的时候，细胞和细胞之间的连接没有分开；消化过度的时候，圆形的细胞容易聚堆，再分开很困难！

• 状态不好、老化的细胞，也可能会出现抱团生长的情况（比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态差）。

• 传代时没有吹打均匀，细胞团多，培养时就会是一团一团的。

• 传代后细胞铺板不均匀。

• 有可能是杂细胞，或者死细胞。

• 细胞未消化开。

• 非震荡培养或细胞量过多的话就会成团。

如何避免细胞抱团？

• 用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞。

• 对于贴壁非常牢固的细胞（如MDCK），为了细胞更好的状态，更漂亮的样子，建议分多批多次消化，这样才能最大限度地降低胰酶对细胞的损伤，保证细胞的状态能够*。

• 细胞生长密度不要太高，70%－80％就好（细胞刚刚基本成单层细胞，没有出现堆叠生长），这样细胞抱团的几率就大大减少了。如果细胞已经长成集落，可先将细胞低密度传代，第二天再消化传代，这样连续传三次，细胞抱团就会越来越小，这样几代过后，再按照常规消化方法和时间能将细胞逐渐传成单个的。

• 消化过程中最好不要使劲摇动培养瓶，这样细胞特别容易成屑样脱落。细胞一旦脱落入悬液里就很难再将他吹打成单个（因为细胞没有受力点了，所以细胞很难分散开）。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，严格控制好消化程度。

• 消化过程需要使用枪头轻轻吹打，切忌使劲拍培养瓶的侧壁。拍瓶子想要将细胞拍散的力度对于细胞来说相当于大地震，细胞本身是无法承受如此振荡的。

细胞抱团了，要如何处理？