销售热线

19126518388
  • 技术文章ARTICLE

    您当前的位置:首页 > 技术文章 > 实时荧光定量PCR的优化(五)

    实时荧光定量PCR的优化(五)

    发布时间: 2021-10-12  点击次数: 318次

    想要提高探针的的效果,可以考虑在探针上采用LNA(锁核酸)碱基或MGB(小沟结合剂)基团。


    这样做的效果是:

    1、增强探针与靶序列的杂交强度。增强结合的特异性后,背景噪声降低,从而提高整个实验的灵敏度。


    2、一般为满足设计要求,AT序列丰富的探针需要长达40个核苷酸。通过LNA碱基或MGB的取代,可以将长度减少至13~20个核苷酸,而不影响效果。


    为什么这样的方法可以提高探针的效果?


    LNA碱基是一种核苷酸类似物,其化学结构可以限制DNA构象为理想的Waston-Crick双螺旋结构。每插入1个LNA碱基,可以使Tm值增加3~6°C。


    MGB基团是一个能结合到DNA小沟的三肽分子,能与互补的单链DNA高特异性、高强度地结合。


    例如SNP基因分型实验,要求所有引物、探针复性温度一致的多重PCR实验,就很适合使用这个方法。


在线咨询
咨询热线

0759-5588931

[关闭]