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    酵母和细菌蛋白质的代谢放射标记的方法

    发布时间: 2021-11-08  点击次数: 271次
    材料与仪器

    细胞
    基本培养基

    实验步骤

    1. 接种细胞于只含有必需氨基酸和辅因子的已知成分的基本培养基,于合适温度中度振荡培养过夜。

    2. 用新鲜的基本培养基稀释培养物,继续温育至 107 细胞/ml (酵母)或对数期中期(细菌)。

    3. 5000 g 室温离心 10 分钟收集细胞,用无硫酸盐基本培养基重悬至 107 细胞/ml(酵母)或 5X108 细胞/ml(细菌)。

    4. 加 H235SO4 至终浓度 20 μCi/ml。于适宜温度轻度振荡培养 1 小时(酵母)或 20 分钟(细菌)。

    5. 5000 g 室温离心 10 分钟收集细胞,吸出培养基,倒入放射性废料桶。

    6. 用冰冷的基本培养基重悬细胞,如第 5 步离心收集细胞。将上清倒入放射性废料桶。用巴氏滴管吸去离心管壁残存的上清。


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