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    Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验方法

    发布时间: 2021-11-12  点击次数: 289次
    实验步骤


    1. 靶细胞的标记 
    用5μmol/L Calcein AM 37℃ 水浴30min进行标记。
     
    2. 效-靶细胞作用 
    杀伤实验在圆底96孔培养板中进行。按E/T比例:50/1、25/1、12.5/1、6.25/1、3.13/1、1.56/1加入梯度稀释的效应细胞与标记好的靶细胞各l00μl/孔,每个比例3复孔。同时设自发释放组3复孔,完全释放组3复孔。效-靶细胞作用96孔培养板在37℃ 5% CO2培养箱孵育4h后,3000r/min离心5min,将上清移入新的孔中。
     
    3. 荧光检测 
    用荧光测量仪检测上清的荧光值(FI),激发光为485nm,发射光为538nm。
     
    4. 结果计算
    杀伤率(%)=■×100%



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