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    大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法

    发布时间: 2021-12-04  点击次数: 338次

    材料与仪器

    SD大鼠
    PBS FBS DMEM
    手术剪 手术钳 眼科剪刀 眼科镊子 大头针 手术刀 培养皿

    步骤

    一、实验步骤

    1. SD 大鼠(150-200 g),断头,浸入75%的酒精中15 min。

    2. 置入超净台中,将大鼠固定于杀鼠板上,在无菌条件下打开腹腔,分离出胸主动脉、腹主动脉, 摘出。

    3. PBS 清洗3 遍,剥去外膜,用手术刀片刮去内膜,留下中膜并将其移入1 mL 的培基中、剪成1x1 mm2 大小组织块。

    4. 再将PBS清洗组织块,移入25 mL 的培养瓶中,用尖嘴弯管均匀贴好组织块,放入37℃、5% CO2的培养箱倒置培养6 小时后,待组织块贴壁后,再加入2.5 mL 培养液后放回培养箱中。

    5. 随后每3 天予以全量换液。

    二、结果

    3-5 天后可见组织块周围有细胞爬出,大约2 周后80-90%融合。


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