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    小鼠皮脂腺的油红染色实验步骤

    发布时间: 2021-12-12  点击次数: 654次

    材料与仪器


    器材:棕色可密封瓶、研钵、漏斗、定性滤纸、冷冻切片等
    试剂:

    ① 油红染料(称取预先研磨粉碎的 0.5 g 油红干粉,溶于少量异丙醇中,然后加异丙醇至 100 ml,棕色瓶密封(或锡箔纸包裹避光)4 ℃ 保存,为储存液,可长期保存。用时油红工作液需现配:取 6 ml 加三蒸水 4 ml 混匀,定性滤纸过滤,稀释后数小时内用完)


    ② 异丙醇


    步骤


    小鼠皮脂腺的油红染色实验的基本过程可分为如下几步:

    1. 将冷冻切片从冰箱中取出,晾干。

    2. 用 PBS 洗 3 次,每次 5 分钟。

    3. 用 4% 多聚甲醛固定 5~10 分钟。

    4. 用蒸馏水洗两遍,每次 5 分钟。

    5. 将切片放入 60% 异丙醇洗两遍,每次 5 分钟。

    6. 将切片放入油红工作液染色 15 分钟。

    7. 用 60% 异丙醇洗两遍,每次 5 分钟。

    8. 用蒸馏水洗两遍,每次 5 分钟。

    9. 苏木素复染 2 分钟。

    10. 水充分漂洗 10 分钟,把周围水分抹干。

    11. 封片剂封片,镜检。结果示例如图 8-11-2 所示。


    注意事项


    1. 由于脂肪易溶于有机溶剂,所以显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理,而通过冷冻切片染色来显示。
    2. 做脂肪染色的冷冻切片不能太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。
    3. 苏木素复染时间不能过长。
    4. 染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。


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