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    大鼠平滑肌细胞的贴壁培养方法

    发布时间: 2022-10-24  点击次数: 200次

    贴壁法:

    器械
    显微器械:眼科剪一把,直弯眼科镊各一把,细结镊一把,手术刀一把,针头诺干
    杀老鼠器械:手术剪一把,大镊子一把,弯眼科镊一把,组织钳一把,50ml烧杯一个(锡纸包好)
    另外:10ml离心管两个,培养皿两个,10ml的瓶子三个,小滤器两个,硅胶板一块,培养瓶盖子诺干
    贰。试剂
    D-HANKS液250ml,双抗2ml(青霉素16万U/ml链霉素15万U/ml)。FBS和含20%FBS的DMEM
    叁。步骤
    1. 取大鼠,称重,水合氯醛0。3ml/100g腹腔麻醉
    2. 绑好大鼠,先剪开腹腔,剪断腹部大动脉放血,后剪开胸腔,取肺
    3. 放入烧杯,后移入超净台,置于冰盒上。以后的操作皆在冰盒上操作
    4. 倒入已加双抗的D-HANKS,清洗肺部,扯掉食管,剪掉心脏
    5. 用针头将肺固定在硅胶板上,硅胶板置于培养皿里
    6. 用镊子将肺的内外膜除去,只剩下平滑肌
    7. 用眼科剪将肺部剪成1-2mm的小碎块
    8。在培养瓶中加入一到两滴的FBS,轻摇培养瓶,使血清铺满瓶底。
    9。用眼科剪将碎块放进瓶中,后用滴管将碎块在瓶里铺均匀。
    10。将瓶底朝上,放入培养箱中
    11。四个小时后,将瓶子翻回
    这样处理后,一般五天内不用看它,第六天开始,可以加入含20%FBS的DMEM


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    安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户,提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂;inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产,包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等,为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务;提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务,努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业


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