销售热线

19126518388
  • 技术文章ARTICLE

    您当前的位置:首页 > 技术文章 > 如何培养大鼠平滑肌细胞?

    如何培养大鼠平滑肌细胞?

    发布时间: 2022-10-24  点击次数: 189次

    一、  器械
    显微器械:眼科剪一把,直弯眼科镊各一把,细结镊一把,手术刀一把,针头诺干
    杀老鼠器械:手术剪一把,大镊子一把,弯眼科镊一把,组织钳一把,50ml烧杯一个(锡纸包好)
    另外:10ml离心管两个,培养皿两个,10ml的瓶子三个,小滤器两个,硅胶板一块,培养瓶盖子诺干

    二、试剂
    D-HANKS液250ml,双抗2ml(青霉素16万U/ml链霉素15万U/ml),一型胶原酶,木瓜酶,BSA。后三种加上D-HANKS配成1ml的消化液,终浓度皆为1mg/ml。无血清DMEM和含20%FBS的DMEM

    三、步骤
    1.  取大鼠,称重,水合氯醛0。3ml/100g腹腔麻醉
    2.  绑好大鼠,先剪开腹腔,剪断腹部大动脉放血,后剪开胸腔,取肺
    3.  放入烧杯,后移入超净台,置于冰盒上。以后的操作皆在冰盒上操作
    4.  倒入已加双抗的D-HANKS,清洗肺部,扯掉食管,剪掉心脏
    5.  用针头将肺固定在硅胶板上,硅胶板置于培养皿里
    6.  用镊子将肺的内外膜除去,只剩下平滑肌
    7.  用眼科剪将肺部剪成1-2mm的小碎块
    8.  将碎块移入配好的消化液中,放入培养箱中,消化15min
    9.  取出,加入无血清的DMEM,约10ml,移入离心管中
    10.  980转/min,离心10min
    11.  倒掉上清,加入约1ml含20%FBS的DMEM
    12.  将碎块用滴管加入25ml的培养瓶里,液体不要加多,有种湿湿的感觉即可。一到两天可以再加点液体
    13.  大概五到七天可以爬出


    以上就是本期的内容,更多资讯,欢迎点击安培生物网站链接了解更多技术与产品资讯

     

    安培生物科技有限公司介绍:

    安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户,提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂;inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产,包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等,为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务;提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务,努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业


在线咨询
咨询热线

0759-5588931

[关闭]