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    染料排斥法测定细胞生存力实验

    发布时间: 2022-12-13  点击次数: 160次

    原理

    萘黑、台盼蓝以及很多其他染料[KahenbachetaL1958]均不能透过活细胞。

    将细胞悬液与染料混匀,在低倍显微镜下检査。

    材料与仪器

    胰蛋白酶
    巴斯德吸管 显微镜 手执计数器 生存力染料 血细胞计数板

    步骤

    材料

    无菌

    受试细胞,如胰蛋白酶消化的贴壁细胞、融化冷冻的细胞或原代离散的细胞
    合适的生长液 20ml
    0.25% 胰蛋白酶 5ml
    D-PBSA10ml

    非灭菌

    血细胞计数板
    生存力染料 1ml (如用D-PBSA 或HBSS 配制的 0.4% 台盼蓝或 1% 萘黑)
    巴斯德吸管
    显微镜
    手执计数器

    操作步骤

    1. 用胰蛋白酶消化或离心与重悬,制备高浓度的细胞悬液(约1X106 个/ml)。

    2. 取一块干净的血细胞计数板,将盖玻片间定在适当位置上。

    3 . 将一滴细胞悬液和一滴(台盼蓝)或四滴(萘黑)染料混匀。

    4 . 加至血细胞计数板的计数室中。

    5 . 静置1~2min (但不要放置很久,否则活细胞会受到损伤而吸收染料)。

    6 . 将计数板置于显微镜下,选择10X 物镜,利用网格线聚焦。
    7 . 计数细胞总数以及着色细胞数。

    8 .清洗血细胞计数板,放人盒内。

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    安培生物坚持为生命科学研究、活体动物转染、大规模生物生产、基因和细胞治疗领域客户,提供*细胞体内可代谢的核酸转染试剂;inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品旨在支持广泛的细胞扩增和生产,包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等,为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务;提供以植物生物为平台基因序列全人源化、*的细胞培养可分解3D基质胶产品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、对细胞无毒性影响、高纯度的一型胶原蛋白产品。安培生物专注为生物医药领域提供优质的产品和技术服务,努力发展为基因治疗、细胞治疗的生物科技企业



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