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    染料摄取法测定细胞生存力实验

    发布时间: 2022-12-13  点击次数: 153次

    原理

    细胞悬液用碘化丙啶和二乙酰荧光素的混合液染色,用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

    材料与仪器


    步骤


    材料

    无菌

    单细胞悬液
    双醋酸荧光素,10ug/ml,溶于 HBSS
    碘化丙啶,500ug/ml

    非灭菌

    荧光显微镜
    滤光片
    荧光素:激发 450/590 nm ,发射 LP 515 nm
    碘化丙啶:激发 488nm ,发射 615 nm

    操作步骤

    1. 细胞悬液的制备与染料排斥法相同(见方案 22.1),但是生长液中不含酚红。
    2. 以 1 : 10 的比例加入荧光素染料混合液,二乙酰荧光素的终浓度为 l ug/ml,碘化丙啶的终浓度为 50ug/ml。 :
    3. 将细胞置于 37°C , 温育 10 min。
    4. 将一滴细胞滴在载玻片上,盖上盖玻片,用荧光显微镜观察。


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