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    细胞中液泡系活体染色

    发布时间: 2023-01-12  点击次数: 42次

    简介

    细胞中液泡系活体染色实验是利用中性红(neutrol red)是液泡系的专一性活体染色剂的特性,在细胞处于生活状态时,只将液泡系染成红色,细胞质和细胞核不被染色。

    原理

    细胞中液泡系活体染色实验的基本原理是动物细胞内由单层膜包裹的小泡都属于液泡系,包括高尔基复合体、溶酶体、内质网、转运泡、吞噬泡等。软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体,能合成与分泌软骨黏蛋白及胶原纤维等,因而液泡系发达。中性红(neutrol red)是液泡系的专一性活体染色剂,在细胞处于生活状态时,只将液泡系染成红色,细胞质和细胞核不被染色。

    材料与仪器

    器材:
    解剖器材、蜡盘、载玻片、盖片、吸管、吸水滤纸、普通光学显微镜、蟾蜍。
    试剂:

    ① 1/3000 中性红;

    ② 0.65% Ringer 液(两栖动物用)(氯化钠,0.65 g;氯-化-钾,0.042 g;氯化钙,0.025 g;蒸馏水,100 ml。)

    步骤

    细胞中液泡系活体染色实验的基本过程可分为如下几步:
    A 取蟾蜍 1 只,捣毁脊髓法处死,将其腹面朝上固定于蜡盘上,剪开腹腔,取胸骨剑突软骨最薄部分的一小片,置于载片上。
    B 滴加 1/3000 中性红,染色 15 min。
    C 滤纸吸去染液。
    D 滴加 0.65% Ringer 液,盖上盖片,用滤纸从盖片侧面吸取多余液体。
    E 镜下观察。

    注意事项

    1 为便于观察,在取胸骨剑突时,尽量取较薄部位。

    2 本实验因是活体染色,在实验的整个过程中,应注意保持标本的活体状态,特别在取材时应做到准确、快速。


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