销售热线

19126518388
  • 公司动态NEWS

    您当前的位置:首页 > 公司动态 > 使用zeta life转染试剂过程应注意以下几点

    使用zeta life转染试剂过程应注意以下几点

    发布时间: 2022-12-09  点击次数: 115次
       zeta life转染试剂用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中,可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等,可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞。
      使用zeta life转染试剂过程要注意以下几点:
      1.细胞密度:转染质粒时,细胞密度为80-100%,转染RNA(siRNA或miRNA)时,细胞密度为60-80%,具体细胞密度必须结合考虑核酸种类、转染试剂种类和细胞生长密度极限。
      2.RNA用量:10-30 pmol/孔(以24孔板为例),具体用量根据转染效率检测实验确定。
      3.试剂用量:转染试剂说明书推荐了一个使用范围,具体用量根据转染效率检测实验确定。
      4.根据转染效率检测实验确定核酸的用量及转染试剂的用量(核酸与转染试剂的比例关系),转染效率检测实验一般在24孔板中进行,其他格式的培养器皿请根据底面积的比例进行计算。
      5.转染试剂使用前才从4℃中取出,取用前,先短暂离心,然后放在涡旋振荡器上点动混匀三次,每次持续1秒,混匀后短暂离心,上述措施是为了混匀转染试剂,保证使用效果,使用后立即放回4℃保存。
      6.核酸和转染试剂分别用Opti-MEM稀释,稀释的核酸可以通过弹匀,吹打均匀,颠倒混匀或涡旋点动混匀,稀释的转染试剂可以通过弹匀,颠倒混匀或涡旋点动混匀,不可使用吹打均匀;混匀后均需短暂离心。
      7.把稀释的核酸和稀释的转染试剂复合混匀时,应该把稀释的核酸加入稀释的转染试剂中(顺序不可调转);加入后立即进行(不要耽搁)弹匀或颠倒混匀,先不进行短暂离心,待所有的管子复合完毕后,在一起进行涡旋点动混匀三次,每次持续1秒,然后短暂离心。
      8.转染复合物孵育形成时尽量避光室温或37℃放置。
      9.进行RNA转染时,尽量使用无酶及灭菌处理的耗材。
在线咨询
咨询热线

0759-5588931

[关闭]